裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)在腫瘤研究中具有不可替代的作用,它不僅可以揭示腫瘤的生物學(xué)特性,還可以為藥物研發(fā)和治療方案制定提供重要依據(jù)。
進(jìn)行裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)的原因主要有以下幾點(diǎn):
研究腫瘤生物學(xué)特性:人體腫瘤移植于免疫缺陷的裸鼠體內(nèi)后,能保持其生物學(xué)特性,可以觀察和研究腫瘤細(xì)胞在體內(nèi)的生長、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為,這對于理解腫瘤的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制具有重要意義。
評估腫瘤生長和侵襲能力:可以直觀地展示腫瘤在體內(nèi)的生長速度和侵襲范圍,為評估腫瘤的生長和侵襲能力提供直接證據(jù)。這對于制定和調(diào)整治療方案具有指導(dǎo)意義。
藥物敏感性研究:在裸鼠體內(nèi)形成的腫瘤模型可以用于研究人體腫瘤對藥物的敏感性。通過給予不同的治療藥物,觀察腫瘤的生長變化,可以評估藥物的療效和毒性,為開發(fā)新的腫瘤治療方法和藥物提供重要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
易于控制和重復(fù)實(shí)驗(yàn):裸鼠作為模型物種,具有易于維護(hù)、繁殖數(shù)量大、易存活等特點(diǎn)。這使得實(shí)驗(yàn)條件易于控制,實(shí)驗(yàn)結(jié)果易于重復(fù),從而提高了實(shí)驗(yàn)的可靠性和準(zhǔn)確性。
裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)中的細(xì)胞準(zhǔn)備與接種:
細(xì)胞狀態(tài):確保所選用的細(xì)胞處于對數(shù)生長期,細(xì)胞密度達(dá)到80~90%左右時(shí)收集。收集細(xì)胞前一天晚上更換新鮮培養(yǎng)基,確保細(xì)胞處于良好的生長狀態(tài)中。細(xì)胞活性是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的關(guān)鍵因素,必須選用活性高的腫瘤細(xì)胞,并避免使用已長時(shí)間傳代的細(xì)胞。
細(xì)胞消化與洗滌:使用胰酶消化細(xì)胞后,用預(yù)冷的PBS洗滌兩遍,以清除殘留的血清和胰酶。洗滌過程中應(yīng)輕柔操作,避免對細(xì)胞造成損傷。
細(xì)胞懸液制備:將細(xì)胞沉淀用PBS或無血清培養(yǎng)基吹打至合適的濃度。
接種技巧:
1.接種前將細(xì)胞懸液充分吹散,防止細(xì)胞成團(tuán)。
2.選擇血供豐富的部位進(jìn)行接種,如腋窩中后部。接種時(shí)針頭應(yīng)深入皮下約1cm,并在皮下左右滑動幾次,使細(xì)胞接種成團(tuán)。
3.接種后應(yīng)輕輕按壓接種部位,防止細(xì)胞懸液從針眼溢出。
4.為減緩細(xì)胞凋亡,整個(gè)接種過程應(yīng)將細(xì)胞懸液置于冰上。
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